慢病毒属于逆转录病毒科的RNA病毒，慢病毒载体是以HIV-1为基础发展起来的基因治疗载体。慢病毒转导基因的优点在于不仅可以感染多种分裂和非分裂细胞，且能够高效的将目的基因整合到宿主基因组中并长期稳定表达。

 

     CAR-T技术是基于慢病毒载体将CAR转导到T细胞中稳定表达以构建CAR-T细胞，该技术已在癌症治疗中显示出良好的发展前景。到目前为止，全球已有五款针对血液性恶性肿瘤的自体型CAR-T上市。慢病毒载体同时也越来越受到科研工作者的青睐，而病毒滴度即是重要的指标之一。常用的检测方法有免疫染色法、荧光定量PCR法、P24蛋白ELISA检测等。

荧光染色法

 

    利用病毒进行抗原-抗体显色反应或慢病毒载体上带有荧光标签，如RFP可以利用荧光显微镜在相应的激发光波长下观察荧光表达的情况。

 

实时荧光定量PCR技术

 

    利用基于SYBRGreen的实时荧光定量PCR技术，在PCR反应体系中加入荧光基团，检测荧光信号对PCR过程进行实时监测，最后通过标准曲线对未知模板进行定量。通过Ct值与标准曲线对模板进行定量分析，并根据公式计算慢病毒滴度。

 

ELISA检测P24蛋白

 

    P24蛋白是慢病毒外壳中含量最高的标志性蛋白，那么理论上检测p24蛋白就可以对慢病毒滴度进行定量。根据此原理设计了慢病毒滴度ELISA检测试剂盒（BF06203），通过双抗体夹心法可定量检测HIV-1 p24蛋白，适用于血清、培养上清等多种样品中的慢病毒滴度检测。

 

 除了上述常规方法进行滴度检测外，博奥龙基于胶体金侧向层析技术设计了HIV-1 p24蛋白半定量检测卡，该产品具有如下优点：

1. 无需使用qPCR或ELISA法检测，10min即可判定细胞转染是否成功；

2. 根据比色卡颜色深浅，可半定量检测病毒滴度，评估是否进行收毒；

3. 针对反复收毒，可选择比色卡固定颜色值，达到相应颜色即可收毒，方便快捷。